Гексамитоз у скалярии

Введение

Не вдаваясь в детали строения клетки Дипломонад (с которыми читатель может ознакомиться самостоятельно — Poynton, Sterud, 2002), отмечу интересные моменты, затронутые авторами данной статьи:— определение вида Дипломонад (Diplomonadina), семейства Hexamitidae невозможно без изучения ультраструктурных особенностей клетки.

Схематичная иллюстрация строения Дипломонад семейства Hexamitidae. У родов Hexamita и Spironucleus имеются пакеты жгутиков в месте их схождения, а у Octomitus они отсутствуют. Отличаются размеры и форма двойных ядер клеток, расположение кинетосом у основания жгутиков, а также канал выхода жгутика сзади клетки. Мелкие элементы не показаны для упрощения. Длина жгутиков у реальных Дипломонад гораздо больше

Рисунок. Жгутиконосцы Дипломонад, приготовленные различными техниками и рассматриваемые под световым микроскопом. (a,b) Свежие образцы сферического и удлиненного трофозоита Spironucleus torosa (интерференционный микроскоп Номарского); (c,d) сырые препараты Spironucleus torosa, окрашенные Протарголом (препарат коллоидного серебра, протеиновое серебро), отмечены V-образная структура на заднем конце клетки [на TEM снимке изображены в виде двух колец микротрубочек, поддерживающих выступ около тела, рекуррентные жгутики проходят около центра клетки];

https://www.youtube.com/watch?v=ytdev

(e) препарат Spironucleus torosa, окрашенный Протарголом (препарат коллоидного серебра, протеиновое серебро) по методу с фильтрацией, отмечена темная область на заднем конце тела (на TEM снимке изображены как обширная симметричная система микротрубочек, поддерживаемая удлиненной конструкцией пересекающихся ребер на заднем конце тела), бугорок, прохождение рекуррентных жгутиков под поверхностью клетки;

(f) неопределенный вид Дипломонад (стрелки) в мазке крови, окрашенном по Лейшман-Гимза, видны ядро и путь рекуррентных жгутиков через клетку; (g) культура S. barkhanus, окрашенные 4′-6-диамино-2-фенилиндолом (DAPI), наблюдение под световым полем и УФ-излучением, ядро выглядит сине-фиолетовым (белое на фотографии);

(h) Spironucleus torosa в срезах ткани (полость прямой кишки), окрашенная по Фельгену (реакция Фельгену); (i) Spironucleus torosa в срезах ткани (полость прямой кишки), окрашенная гематоксилином-эозином. Аббревиатуры: (cp) каудальная проекция; (p) бугорок; v – V-образная структура на заднем конце тела (масштаб = 10 мкм).

Среда обитания

Одноклеточные жгутиконосцы могут жить в окружающей среде, особенно, в загрязненной воде и осадке, либо быть паразитами беспозвоночных (моллюсков, ракообразных), рыб, амфибий, птиц, мышей и других млекопитающих. Их основной функцией в среде обитания является переваривание бактерий для получения питательных веществ.

Наиболее известные дипломонады это Лямблии (Giardia), которые чаще всего выступают первопричиной диареи у людей по всему миру. Этот организм также может привести к смерти маленького ребенка или людей с иммунодефицитом. Паразит прикрепляется к верхней стенке кишечника и, размножаясь, начинает выделяться с фекалиями.

Он устойчив к дезинфицирующим средствам, например, хлору в плавательном бассейне. Цисты длительное время сохраняются в воде, и проглатывание даже их небольшого числа приводит заражению. У рыб аналогичным образом происходит заражения другим жгутиконосцем Spironucleus. Он инфицирует Арктического гольца, форель, дикую и культурную рыбу, других тропические аквариумные виды, мышей и птиц.

Успешный контроль инфекции зависит от понимания биохимических различий между возбудителем и его хозяином, в частности, формирования стенки цист. Дипломонады предпочитают среду с низким содержанием кислорода, они слабо защищены от воздействия воздуха. Таким образом, введение окислителей (озона, активного форм хлора, перекисей) в воду поможет бороться с ними [Lloyd, Williams, 2014].

Предлагаем ознакомиться:  Скалярия голубой жемчуг

Заражение и распространение гексамитоза

Возбудитель гексамитоза инфицирует диких и культурных рыб, в том числе, аквариумных цихлид (дискусов, скалярий, астронотусов). Паразит селится в начале кишечника, сразу после желудка.

Скорее всего, жгутиконосцы переносятся горизонтально. Цисты или трофозоиты (вегетативная стадия развития) попадают в организм с водой, загрязненной фекалиями. Жгутики позволяют паразиту достигать верхнего отдела кишечника. В кишечном тракте дипломонады свободно перемещаются в просвете и каловых массах.

Время генерации жгутиконосца составляет 24 часа. С кровью паразит проникает в другие части организма, и его популяция возрастает.

Помимо заражения внутренних органов, не исключается заражение покровов тела, появление язв и эрозя боковой линии.

Среди пресноводных аквариумных рыб особенно восприимчивы к возбудителю гексамитоза Окунеобразные (цихлиды). Реже заболевают Карповые – кои и золотые рыбки.

Диагностика

Точная диагностика гексамитоза проводится посредством микроскопического исследования давленых препаратов кишечника (увеличение 200-400х), либо фекалий. Жгутиконосцы двигаются быстро и беспорядочно. Их легко заметить в области отслоения слизистой оболочки и при серьезном заражении [Sahandi, Hajimoradloo, 2011].

У живых особей после проведения наркотизации, легким надавливанием на брюшко, выдавливают каловые массы из кишечника. Образец наносят на предметное стекло и добавляют три капли воды. Накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом (400х).

Степень инвазии паразита может быть оценена по следующей шкале [Tojo, Santamarina, 1998]:Ноль (-) — на площади стекла 24х32 мм отсутствует возбудитель гексамитоза;Минимальная ( /-) — на площади стекла 24х32 мм обнаружен только один паразит;Низкая ( ) — обнаружено более одного паразита во всем препарате (24х32 мм), в поле микроскопирования менее 10 особей;Умеренная ( ) – в поле микроскопирования 10-50 особей;Высокая ( ) — в поле микроскопирования {amp}gt;50 особей

Аутопсия

У мертвых рыб берут область кишечника сразу после желудка. У больных особей этот отдел имеет ярко-желтую окраску (из-за выделения желчи). Готовят давленые препараты кишечника и рассматривают под микроскопом.

Плавники рыб темные и в основании имеют кровоизлияния. Чешуя покрыта беловатой, желтоватой слизью. Заражению подвергаются кишечник, печень, селезенка, плавательный пузырь, сердце, кожа и плавники. Однако гистологические изменения во внутренних органах отмечаются лишь у некоторых видов.  Так у скалярий образуются гранулемы в печени, происходит инфильтрация макрофагов в селезенке и лимфоцитов в кишечнике. У астронотусов и мбун этого не наблюдается [Suchanya Mankhakhet et al., 2012].

Перед смертью происходят многочисленные внутренние кровоизлияния.

Ткань печени (1), селезенки (2) и кишечника (3) скалярии, зараженной гексамитозом. Окрашивание гематоксилином и эозином. Масштаб 50 и 100 мкм. Gr — гранулема, M — макрофаги, * — область воспаления, инфильтрат лимфоцитов и подслизистая оболочка в кишечнике (Suchanya Mankhakhet et al., 2012)

Для идентификации возбудителя гексамитоза при аутопсии кишечника, рекомендуется предварительно оставить рыб без корма.

Предлагаем ознакомиться:  Сепсис у кошек симптомы — септикопиемия у животных

Стоит отметить, что у рыбок, тяжело пораженных возбудителем гексамитоза (многочисленные паразиты в пилорическом привратнике желудка и кишечнике), по-прежнему могут отсутствовать повреждения слизистого покрова кожи и внешние признаки инвазии в эпителий [Tojo, Santamarina, 1998].

Аутопсия

Как лечить гексамитоз у рыб?

Эффективность в отношении внутренних паразитов простейших, в том числе, жгутиконосцев и инфузорий, показало лишь оральное введение лекарственных препаратов.

Интересное исследование (правда с другим видом жгутиконосца — Ichthyobodo necator), с включением обширного списка препаратов производных и не производных нитроимидазола, провели в 1998 году Тоджо и Сантамарина из испанского университета Сантьяго-де-Компостела, кафедры Микробиологии и Паразитоголии [Tojo, Santamarina, 1998].

В своей работе они использовали протоколы введения веществ в корм в следующих дозах:— доза препаратов не производных нитроимидазола – 40 г/кг корма в течение 10 дней.— доза препаратов производных нитроимидазола – 2-5 г/кг корма в течение 2 дней.

В опытную и контрольную группы входили по 20 особей радужной форели (Oncorhynchus mykiss). Контрольная группа питалась обычным кормом.

По окончании курса приема лекарства, фекалии рыб подвергались микроскопическому исследованию. Активность препаратов оценивалась по оставшемуся количеству паразитов Ichthyobodo necator (жгутиконосцы) (классификация приведена выше). Полученные результаты приведены в таблице.

Таблица 1. Результаты исследования активности препаратов не производных нитроимидазола, признанных неэффективными. Для каждого препарата (во всех случаях вносили 40 г/кг корма в течение 10 дней) изучалась интенсивность инфекции, спустя 24 часа после обработки (24 часа 10 дня). Интенсивность: — высокая, — умеренная, — слабая, -/ — минимальная, — — нулевая (пояснения в тексте).

nd — интенсивность не определена, D — особь погибла в ходе эксперимента [Tojo, Santamarina, 1998]Таблица 2. Результаты исследования активности препаратов не производных нитроимидазола, признанных эффективными. Для каждого препарата (во всех случаях вносили 40 г/кг корма в течение 2 дней) изучалась интенсивность инфекции, спустя 24 часа после обработки (24 часа 2 дня).

Интенсивность: — высокая, — умеренная, — слабая, -/ — минимальная, — — нулевая (пояснения в тексте). nd — интенсивность не определена, D — особь погибла в ходе эксперимента [Tojo, Santamarina, 1998]Таблица 3. Результаты исследования активности 4 препаратов производных нитроимидазола. Для каждого препарата (вносили 2 или 5 г/кг корма в течение первых 2 дней из 10 дней экспериментального периода) изучалась интенсивность инфекции, спустя 24 часа после обработки (24 часа 10 дней).

Интенсивность: — высокая, — умеренная, — слабая, -/ — минимальная, — — нулевая (пояснения в тексте). nd — интенсивность не определена, D — особь погибла в ходе эксперимента [Tojo, Santamarina, 1998]Высокая эффективность препаратов производных нитроимидазола (метронидазола, диметридазола) была подтверждена в экспериментах с подавлением роста культуры Spironucleus vortens в условиях in vitro.

Предлагаем ознакомиться:  Как легко отучить кошку грызть провода в квартире

Сульфат магния (MgSO4) показал низкую эффективность на культуре Spironucleus vortens в условиях in vitro. Лишь в высоких дозах (70 мг/мл) он постепенно снижал число жгутиконосцев (на 12,5% от исходного уровня через 96 часов) [Sangmaneedet, Smith, 1999].

Некоторые авторы предлагают протоколы кормления рыб рационом с добавлением MgSO4 1,5% (в течение 4 дней; Rothenbacher et al., 1975) или 3% (в течение 3 дней; Hamdi Ogut, Abdurrezzak Akyol, 2005). Тем не менее, для борьбы с возбудителем гексамитоза, вероятно, эта соль малоэффективна. По крайней мере, найти исследования, в которых изучалась эффективность MgSO4 при оральном введении больным рыбам, не удалось.

К протоколам лечения, которые предусматривают внесение препаратов в воду резервуара, стоит относиться с осторожностью. Дело в том, что во время вспышки инфекции основная масса жгутиконосцев локализована в кишечнике больных рыб, поэтому добавление препаратов в воду снижает вероятность заражения, но не ликвидирует источник инфекции.

Ichthyobodo necator. Diseases of Aquatic Organisms. 33(3) : 195-9. 1998Poynton S.L., Sterud E. Guidelines for species descriptions of diplomonad flagellates from fish. Journal of Fish Diseases. 25 (1) : 15–31, 2002Fard M.R., Jørgensen A., Sterud E., Bleiss W., Poynton S.L. Ultrastructure and molecular diagnosis of Spironucleus salmonis (Diplomonadida) from rainbow trout Oncorhynchus mykiss in Germany.

Dis Aquat Organ. 75 (1) : 37-50. 2007Guo F.C., Woo P.T. Detection and quantification of Spironucleus barkhanus in experimentally infected Atlantic salmon Salmo salar. Dis Aquat Organ. 61 (1-2) : 175-8. 2004Paull G.C., Matthews R.A. Spironucleus vortens, a possible cause of hole-in-the-head disease in cichlids.

Dis Aquat Organ. 45 (3) : 197-202. 2001Suchanya Mankhakhet, Naraid Suanyuk, Chutima Tantikitti, Wutiporn Phromkunthong, Suphada Kiriratnikom, Theerawoot Lerssutthichawal, Boonkob Viriyapongsutee. Diplomonad flagellates of some ornamental fish cultured in Thailand. Songklanakarin Journal of Science {amp}amp; Technology. 34 (5) : 487-494.

2012Javad Sahandi, Abdolmajid Hajimoradloo. Hole-in-head disease: New method of treatment in flower horn ornamental fish. Human {amp}amp; Veterinary Medicine, 3 (2), 2011Sangmaneedet S, Smith S.A. Efficacy of various chemotherapeutic agents on the growth of Spironucleus vortens, an intestinal parasite of the freshwater angelfish.

https://www.youtube.com/watch?v=ytabout

Dis Aquat Organ. 38 (1) : 47-52. 1999Rothenbacher H.J, Boh M. Hexamita: Pathogenicity and therapy. Fischund Umwelt 1, 13 — 23, 1975Hamdi Ogut, Abdurrezzak Akyol. Prevalence And Intensity Of Hexamita Salmonis In Rainbow Trout Farms In The Southeastern Black Sea And Their Relationship To Environmental Factors. The Israeli Journal of Aquaculture – Bamidgeh. 57 (2) : 97-104. 2005

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Болезни животных
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!:

Adblock detector